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METEOR: 首个一体化的冷冻光电关联成像系统

在我们之前的博文中,我们讨论了冷冻电子断层扫描(cryo-ET)的不同应用,以及一体化荧光显微镜(FLM)如何使这项研究受益。在这篇博文中,我们将深入了解Delmic全新的一体化荧光显微镜模块系统METEOR,并阐释它如何帮助简化您的研究。

高度优化的系统

METEOR是一台集成在(冷冻)聚焦离子束(FIB)和扫描电镜(SEM)室中的荧光显微镜。METEOR安装在扫描电镜的现有端口上,确保了安装的便捷性,而不会对您的扫描电镜系统造成永久性的改变。由于模块化的设计,METEOR可以为您的研究进行优化。发射滤光片是可定制的,以最好地匹配您的荧光标签在冷冻条件下的发射峰。此外,物镜、相机和激发滤光片也可以根据您的意愿进行调

用户友好的开源软件

METEOR配有强大的开源采集软件ODEMIS,该软件具有采集z-stack字、多通道成像和大面积制图等功能。ODEMIS通过Xt适配器控制扫描电镜的阶段,实现从聚焦离子束铣削或扫描电镜成像到荧光显微镜成像的无缝切换。对于高级用户来说,Python脚本界面可以让您完全控制硬件和成像算法。

简化您的工作流程

在扫描电镜内部有一个荧光显微镜将大大减少所需的处理步骤,从而减少污染与损坏,实现更高效的冷冻电子断扫描工作流程。此外,在不转移样品的情况下,在荧光显微镜和扫描电镜成像之间的切换允许荧光显微镜图像和扫描电镜图像的直接相关。这大大加快了感兴趣区域(ROI)的识别速度,并确保铣削过程在正确的部位进行,不会破坏感兴趣的结构。此外,在铣削过程中,我们可以轻松用荧光显微镜检查样品,从而提高最终进入冷冻透射电镜的样品的质量。

广泛使用的系统

METEOR是一个非常灵活的系统,可以应用于广泛的研究领域和工作流程。METEOR可以集成在标准的网格铣削冷冻电泳工作流程中,并加强病毒学膜运输和神经生物学等研究领域。

此外,METEOR可以集成在新开发的自动铣削软件应用中。我们可以根据METEOR拍摄的荧光显微镜图像来选择感兴趣区域。在不同的轮铣后的阶段自动移动到METEOR成像位置和荧光显微镜图像的地方。感兴趣的区域中已经被铣去的层状物可以被丢弃,以优化宝贵的冷冻透射电镜时间。

METEOR还可以简化冷冻聚焦离子束提取Cryo-FIB lift-out)工作流程,这是一项极具前景的技术,可以对多细胞生物或组织的原位结构进行研究。现在的成功率小于20%METEOR的一体化荧光显微镜集成方案将减少样品转移步骤,从而减少表面污染,达到更高的产量。此外,在扫描电镜和聚焦离子束室内有一个荧光显微镜,允许荧光显微镜成像提取的体积,以指导最后的聚焦离子束研磨步骤。

(This work is supported by the Eurostars grant № E13008 - CETFlow)

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METEOR首篇技术说明

了解METEOR的光路设计和组件

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Marit Smeets